مهندسی متابولیک e. coli جهت تولید phb و تسهیل فرآیند لیز باکتری با استفاده از ژن لیز e از فاژ φx۱۷۴

سابقه و هدف: ژنهای بیوسنتزی پلی هیدروکسی بوتیرات در باکتری رالستونیا یوتروفا درون یک اپران قرار گرفته است. مطالعات مختلف نشان دادهاند که میتوان این اپران را در باکتریهای گرم منفی دیگر نظیر e. coli کلون کرد و محصول مناسب به دست آورد. برای این منظور نیازی به تعویض پروموتر نیز نمیباشد، زیرا پروموتر اصلی اپران میتواند در e. coli نیز با کارآمدی، فعالیت نماید. استحصال گرانولهای تولیدی یکی از مباحث مهم بیوتکنولوژیکی جهت تولید صنعتی این ماده میباشد، زیرا روشهای مبتنی بر حلال، یا روشهای فیزیکی علاوه بر بالابردن هزینه ساختار گرانول را نیز به هم میزنند. به همین در این مطالعه جهت استحصال گرانولها از سیستم لیز e استفاده گردید. مواد و روشها: در این مطالعه، به منظور به دست آوردن اپران phb و نیز ژن e از تکنیک pcr استفاده گردید. سپس هر کدام آنها توسط یک پلاسمید مجزا در باکتری e. coli کلون گردید. جهت کنترل فرآیند لیز نیز از پروموتر القا شیمیایی استفاده شد. یافتهها: باکتریهایی که هر دو پلاسمید در آنها کلون شده بود اول phb را در خود به مقدار زیاد بیان نمودند و دوم در زمان مناسب با افزایش القاگر، لیز شده گرانولهای خود را به درون محیط کشت رها نمودند. بحث و نتیجه گیری: میتوان از این روش جهت تولید و استحصال مقرون به صرفهی phb استفاده نمود.